PF-06463922抑制耐克唑替尼crizotinib的突变体的详细介绍

　　为了阐明PF-06463922对ROS1抑制活性的分子基础，我们确定了与ROS1激酶结构域结合的PF-06463922的晶体结构。此处报道的复合物显示出总体蛋白质构象和抑制剂结合位置，类似于先前对ROS1-克唑替尼（crizotinib）复合物的描述。然而，虽然克里唑替尼和的结合取向PF-06463922类似，后者具有用于ROS1 / ALK更大的效力，因为它被用于ROS1 / ALK结合特别优化，而克里唑替尼被设计成一个MET抑制剂。

　　接下来，我们在重组酶和基于细胞的测定中研究了PF-06463922对耐克唑替尼的ROS1G2032R突变的活性。PF-06463922有效地抑制重组ROS1的催化活性G2032R（12 nM）的和CD74-ROS1G2032R在BaF3细胞融合激酶（IC50，nM的203）。这种效应直接转换为抗增殖响应（IC50，nM的177）。我们还认为，表征PF-06463922对ROS1L2026MGatekeeper突变体的作用将很有帮助，因为它有望作为抗克唑替尼治疗的机制而出现在临床上。

　　残基L2026位于抑制剂结合袋的“关守”位置，此残基的突变是临床上针对激酶抑制剂（例如BCR-ABLT315I，EGFRT790M和EML4-ALKL1196M）鉴定的最常见的耐药突变机制）。根据ALK和ROS1 克唑替尼结合位点的相似性，可以预测Leu-2026突变为Met。我们发现，克唑替尼显示的针对ROS1的催化活性降低的效力L2026M在重组酶（ķ我，5.8纳米）和测定法（IC50，为230nm）。一致地，克唑替尼在BaF3-CD74-ROS1L2026M细胞中表现出降低的抗增殖活性（IC50为259 nM）。

　　值得注意的是，针对这两个突变的克唑替尼浓度无法在临床上实现。另一方面，PF-06463922有效抑制ROS1L2026M，Ki为0.1 nM，并抑制细胞CD74-ROS1L2026M激酶活性和细胞增殖，IC50值分别为0.57和1.1 nM。与其他ROS1 / ALK抑制剂相比，PF-06463922在抑制激酶活性和表达ROS1融合突变体（G2032R和L2026M）的细胞生长方面的功效比塞立替尼和艾乐替尼高50倍以上。

　　PF-06463922在细胞CD74-ROS1G2032R自磷酸化，下游信号传导和细胞生长方面显示出与沃利替尼相似的功效，并且在抑制CD74-ROS1L2026M激酶活性和细胞生长方面更有效。现在克唑替尼的价格是多少？更多详情可咨询下方微信。