劳拉替尼lorlatinib的耐药机制的完整范围

　　劳拉替尼，最近已经授予FDA批准，是为患者克里唑替尼后进展的新的标准治疗，并用ceritinib或alectinib前期治疗之后的第二代ALK抑制剂或，和ALK-靶向治疗。通过这项研究，我们通过深入的分子谱分析以及PDX和细胞系的发展，通过对肿瘤活检和ctDNA的纵向评估，了解了对这种靶向药物产生抗性的适应性机制。　　

　　Yoda及其同事最近描述了ALK激酶结构域的单个等位基因上突变的连续积累，以介导约35％先前接触过第一代和第二代TKI的患者的耐药性。除了这些关键发现之外，我们还从患者肿瘤活检组织中鉴定并鉴定了三个新的化合物突变（F1174L / G1202R，L1196M / D1203N和C1156Y / G1269A）。C1156Y / G1269A复合突变在Ba / F3细胞和患者来源的细胞系中均保持了对lorlatinib的敏感性，这表明即使在存在复合突变的情况下，共同存在的脱靶耐药机制也可以驱动疾病进展。与先前描述的L1196M / G1202R突变相似，L1196M / D1203N突变赋予劳拉替尼耐药性高水平。另一方面，与单个G1202R突变相比，G1202R / F1174L复合突变导致对lorlatinib的耐药性温和增加，并且可能通过增加体外lorlatinib剂量来靶向。然而，由于毒性增加的风险，这种方法在患者中不可行。最近的一项研究进一步证明了这一点，该研究报告了通过ENU诱变筛选从G1202R突变型Ba / F3细胞中获得的F1174L突变的体外获得，该突变暴露于低剂量的劳拉替尼，传达了对该药物的低水平耐药性。在该患者中，在ctDNA中检测到多个继发性ALK突变，其中G1202R和S1206F被证实是顺式的，表明复合突变可能是多克隆事件。　　

　　我们对患者衍生细胞系的研究允许进一步探索对劳拉替尼耐药的脱靶机制，为过去在设计新的治疗策略中的努力做出了贡献。我们开发了两种患者来源的细胞系，这些细胞系在含有SRRC激活的lorlatinib的治疗下进行了体外EMT 。EMT先前已暗示在抗ALK抑制剂和在肺癌其他靶向疗法。此外，还已知SRC激活在整个不同癌症类型的EMT的发展中都起着关键作用。Crystal和同事以前曾报道过，几种耐ALK的患者来源的细胞系易受ALK和SRC联合抑制作用。在本研究中，我们进一步证明了这种联系在接受EMT的劳拉替尼耐药患者衍生的细胞系中非常有效，并表明SRC抑制可以部分恢复间充质细胞中E-钙粘着蛋白的表达，而不会完全将它们恢复为上皮表型。有趣的是，正如最近针对EGFR突变型NSCLC所显示的那样，FGFR抑制剂在体外使ALK重排的EMT细胞系对lorlatinib敏感。目前尚无针对进行EMT的肺癌的有效疗法，我们的工作进一步支持针对脱靶耐药机制的患者在临床试验中探索联合策略。　　

　　最后，我们将NF2功能丧失鉴定为对lorlatinib（MR-135）耐药的新型旁路机制，随后在体外通过H3122细胞系中的NF2敲除证实了这些发现。在这种情况下，在进展为克唑替尼时出现了NF2剪接位点突变，在这种情况下，患者经历了对劳拉替尼治疗的初始反应。在抵抗时，NF2中还会发生其他有害事件，并导致有效的旁路机制。我们假设NF2功能丧失是多个转移部位之间的功能融合，在这些部位，顺序的基因组事件导致双等位基因NF2有害突变。该患者来源的细胞系对lorlatinib抗性和由mTOR抑制敏化的体外和体内，构成在此上下文中的新的潜在的治疗方法。　　

　　这项研究有几个局限性，首先是可以评估耐药机制并在该研究中报告的患者人数。在使用劳拉替尼获得部分缓解的四名患者中，PFS范围为3.7（MR144）至16个月（MR210），这似乎比劳拉替尼的II期研究报告的时间短。需要进一步的研究来揭示对lorlatinib的耐药机制的完整范围，包括受益时间长的患者。其次，并非在所有情况下都提供劳拉替尼治疗前的肿瘤活检和血浆样品，这限制了基线基因组改变对劳拉替尼耐药性的影响的分析。第三，患者来源的细胞系的开发过程中，选择压力引入通道通过体外 和治疗暴露可能会导致更具侵略性的肿瘤细胞的生长并迫使其获得EMT功能。　　

　　总之，ALK重排肺癌患者对劳拉替尼耐药的机制可能是多种多样的，也很复杂。我们在这里表明，纵向肿瘤采样与患者衍生模型相结合，可以提供有关肿瘤动力学和疾病进展基础生物学过程的新见解，从而有助于设计新的治疗策略。详情请扫码咨询：