肺癌对达拉非尼和曲美替尼联合治疗的敏感性

　　约有一半的BRAF突变型非小细胞肺癌（NSCLC）携带非V600 BRAF突变，占全世界每年约40,000例死亡。最近的研究表明，与RAF抑制剂达拉非尼（Dabrafenib）和MEK抑制剂曲美替尼（Trametinib）联合靶向治疗可用于治疗V600 BRAF突变型癌症，包括NSCLC。相反，未记录非V600 BRAF突变对这些抑制剂的敏感性。非V600突变可增加或削弱BRAF激酶活性。但是，受损的BRAF激酶仍可以CRAF依赖的方式激活ERK途径。

　　在此，除了描述BRAF突变型NSCLC患者的队列并在功能上分析13个肿瘤衍生的BRAF突变之外，我们证明，两种非V600 BRAF突变类型都可以对HEK293T细胞，肺上皮细胞模型（BEAS-2B）和带有非V600 BRAF突变的人类癌细胞系中临床相关剂量的达布拉非尼和曲美替尼敏感。组合药物治疗进一步降低了这两种类型的突变引起的ERK活性。

　　此外，该组合可导致更长的ERK抑制时间，并在具有两种非V600 BRAF突变类型的细胞中具有抗增殖和促凋亡作用。这项研究为使用Trametinib和Dabrafenib治疗非V600 BRAF突变型肺癌的临床探索提供了基础。组合药物治疗进一步降低了这两种类型的突变引起的ERK活性。

　　与Vemurafenib和Dabrafenib单一疗法相比，在具有BRAF-V600突变的黑色素瘤患者中，与Vemurafenib和Dabrafenib单一疗法相比，达拉非尼与变构性MEK抑制剂曲美替尼的组合可改善总体生存率并降低与悖论性ERK激活相关的不良事件的风险。

　　在本研究中，我们首先描述了一组被鉴定为BRAF突变的NSCLC患者。然后，我们在功能上分析了来自该队列的13种不同的BRAF突变，并补充了先前在NSCLC患者中其他人报道的突变。最后，我们检查了临床相关剂量的达布拉非尼和或曲美替尼对共表达带有wt-CRAF的BRAF和携带非V600 BRAF突变的人类癌细胞系的HEK293T细胞的影响。

　　我们检查了达拉非尼和曲美替尼联合治疗对ERK途径的急性和慢性作用。在给定的细胞系中，我们在药物处理2小时和48小时后对总裂解物进行了蛋白质印迹分析。单一疗法治疗2小时后，所有细胞系均显示p-ERK水平降低。在所有三种细胞系中，与达拉非尼相比，曲美替尼诱导的ERK抑制作用更强。正如预期的那样，联合治疗在所有三个细胞系中均产生最强的ERK抑制作用。

　　为了确定联合治疗是否可以克服对达拉非尼或曲美替尼的早期适应性不敏感性，我们在药物治疗后48小时分析了细胞裂解液。与单一抑制剂治疗相比，联合治疗48小时后，在H1666和H508细胞中未检测到p-ERK水平反弹。联合治疗48小时后，在H1395细胞中，检测到p-ERK水平略有增加。微信扫描下方二维码了解更多：