咨询电话:4000-980-586

康安途海外就医 添加微信

常见疾病库

当前位置: 康安途海外医疗 > 肿瘤新闻 > 达拉非尼Dabrafenib进一步降低了细胞的增殖

达拉非尼Dabrafenib进一步降低了细胞的增殖

时间:2021-02-22 14:11 来源:康安途 作者:康安途海外就医

  确定目标由mir-126-3-p可能影响扩散,侵袭性和响应的dabrafenib耐药细胞,我们集中我们的注意力在ADAM9(disintegrin和金属蛋白酶域9),MMP7(矩阵metallopeptidase7)和PIK3R2(phosphoinositide-3-kinase调节亚基2),三个miR-126-3p靶基因已经在黑素瘤细胞中验证,并显示参与黑素瘤侵袭性(ADAM9和MMP7)和获得性对BRAFi(PIK3R2)的耐药性。 

达拉非尼,Dabrafenib 

  我们还选择了CXCR4(C-X-C基序趋化因子受体4),因为该基因被证明是结肠癌和甲状腺癌细胞中miR-126-3p的直接靶点,而CXCR4/CXCL12(C-X-C基序趋化因子配体12)轴已知可促进黑色素瘤细胞增殖和侵袭。  

  我们初步分析了这4个基因编码的蛋白在A375、A375R、SK-Mel28和SK-Mel28R细胞中的表达水平。在达拉非尼抗药细胞中,ADAM9表达上调,而PIK3R2表达水平相同,MMP7表达下调。SK-Mel28R细胞中CXCR4蛋白水平下调,但A375R细胞中没有。 

  基于这些结果,支持了ADAM9而非其他蛋白在达拉非尼获得性耐药中的作用,我们选择ADAM9进行进一步实验,评估pre-miR-126-3p转染A375R和SK-Mel28R细胞后,该蛋白是否下调。miR-126-3p替代显著抑制两种细胞系中ADAM9的表达。经100nMdabrafenib处理的A375和SK-Mel28亲代细胞中ADAM9表达也降低,这与该药物上调这些细胞中miR-126-3p的发现一致。  

  接下来,我们研究了通过特异性sirna直接靶向ADAM9是否可以降低A375R和SK-Mel28R细胞的增殖和/或增加达拉非尼的敏感性。  

  因此,用siADAM9或siCTRL转染这两种细胞系,转染24小时后用高浓度的达拉非尼孵育,5天后用MTT法检测增殖情况。Westernblotting检测细胞中ADAM9的表达。  

  在这两种细胞系中,siADAM9均降低了靶蛋白水平,显著抑制了增殖。达拉非尼处理对siCTRL/A375R细胞的增殖没有显著影响,而从200nM浓度开始,达拉非尼进一步降低了siADAM9/A375R细胞的增殖。siCTRL/SK-Mel28R和siADAM9/SK-Mel28R细胞对达拉非尼的反应表现出类似的行为,因为它们的增殖不受800nM药物浓度的影响,并受到更高浓度的刺激。  

  然而,siADAM9/SK-Mel28R细胞在各dabrafenib浓度下的增殖均显著低于siCTRL/SK-Mel28R细胞,且在800-1600nM药物浓度范围内,siADAM9/SK-Mel28R细胞的增殖均不超过dmso处理的siCTRL转染细胞。

  接下来,我们评估了ADAM9是否参与调节达拉非尼Dabrafenib耐药细胞的侵袭能力。8f-g、8f-g、ADAM9基因敲低均显著抑制了A375R和SK-Mel28R细胞的侵袭能力。详情请扫码咨询:

达拉非尼,Dabrafenib


添加康安顾问,想问就问

【康安顾问】

7*24小时响应服务需求,服药指导,膳食指导,报告解读,“一对一”定制服务,让您省时省力省心!每个康安顾问背后都有一个庞大的医生团队。

(责任编辑:康安途海外就医)

评论

  • 相关推荐
  • 其他推荐

频道栏目

添加康安途医学博士免费咨询

已有 127822 名患者成功添加
专业医学博士,7*24小时响应服务需求,用药参考,前沿治疗,报告解读等解决您在治疗过程中遇到的所有问题。

肿瘤新闻文章

本周热门文章
咨询电话

微信咨询

微信

扫描二维码
免费咨询医学博士