奥希替尼(osimertinib)在携带EGFR Ex20Ins患者中的抗肿瘤活性

　　EGFR 外显子 20 插入 (Ex20Ins) 占非小细胞肺癌 (NSCLC) EGFR 激活突变的 4-10%。EGFR Ex20Ins肿瘤通常是无反应1日和2次EGFR Ex20Ins NSCLC 患者的当前护理标准是常规的细胞毒性化疗。因此，开发能够更有效地靶向具有 EGFR Ex20Ins 突变的 NSCLC 的 EGFR TKI 代表了该患者亚群的重大进步。奥希替尼（osimertinib) 是第三代 EGFR TKI 获批用于治疗携带 EGFR T790M 的晚期 NSCLC；然而，奥希替尼在 EGFR Ex20Ins NSCLC 中的活性尚未得到充分评估。体外并证明了体内含有最普遍的 Ex20Ins 的 EGFR 突变肿瘤异种移植物的持续肿瘤生长抑制。本文使用一系列源自患者的异种移植模型进一步描述了奥希替尼和 AZ5104 在携带 EGFR Ex20Ins 的 NSCLC 中的抗肿瘤活性。这些数据共同支持奥希替尼在 EGFR Ex20Ins NSCLC 患者中的临床测试。

　　尽管经批准的 EGFR TKI 疗法在治疗 EGFR 突变 NSCLC 方面取得了成功，但这些药物的益处仍主要限于诊断为典型常见 Ex19del 和 L858R 突变亚型的患者。除了 L858R 和 Ex19del，Ex20Ins 突变体占 EGFR 突变的第三大流行组，占该片段的 4-10%。然而，这个 Ex20Ins 亚组在很大程度上对当前的 TKI 无效，并且仍然是需要确定新的有效治疗方案的未满足需求的关键领域。为此，我们评估了下一代 EGFR TKI 奥希替尼及其代谢物 AZ5104 在代表最常发生的 EGFR 外显子 20 插入的各种临床前模型中的活性。尽管之前的一份报告假设了奥希替尼在 Ex20Ins 环境中的潜力，这项研究仅限于使用体外Ba/F3 工程细胞模型，因此我们采取了更全面的方法来评估更多临床相关模型中的奥希替尼，并进行了额外的体内研究。

　　Ex20Ins 的一个关键挑战是突变景观更加多样化，确定了 100 多个潜在突变，因此分析所有可能的 Ex20Ins 变体是不可行的。我们的主要策略是因此集中奥希替尼（osimertinib) 的评价在两个最普遍的形式Ex20Ins的（D770_N771InsSVD和V769_D770InsASV），占这些患者（约40％的）。我们的研究结果提供证据表明，Ex20Ins 突变的两种最常见的临床变异，SVD (D770_N771InsSVD) 和 Ex20Ins ASV (V769_D770InsASV)，以类似于规范激活突变的方式组成型活跃。重要的是，我们在这里报告了奥希替尼和 AZ5104（奥希替尼的循环代谢物）针对这两种临床上最普遍的 Ex20Ins 突变变体的临床前活性。尽管 EGFRex20Ins 存在突变异质性，我们建议可以有效靶向这些普遍突变的 TKI 可能至少为该 EGFR 突变子集提供显着的临床益处。此外，我们使用工程化的临床前模型和患者来源的异种移植物 (PDX) 证明了针对各种不太流行的 Ex20Ins 突变的活性，表明靶向多种变异形式的潜力更大。

　　鉴于缺乏可用的内源性细胞系模型，我们利用 CRISPR 编辑技术将表达野生型 EGFR 的 NCI-H2073 细胞转化为均匀表达两种最流行的 Ex20Ins 突变体中的每一种的细胞系。使用这种方法，我们能够首次在疾病相关的细胞环境中证明，这些普遍的突变足以赋予非小细胞肺癌细胞对配体非依赖性 EGFR 信号传导的依赖性，并伴随着更常见的 EGFR 突变的标志，例如组成型受体磷酸化和受体内体内化。综上所述，这些研究支持 Ex20Ins 突变具有许多与常见激活突变体相似的信号传导和细胞生物学特征的观点，尽管它们有不同的突变变化。然而，

　　使用体外磷酸化 EGFR 研究，奥希替尼（osimertinib) 及其活性代谢物 AZ5104 有效抑制了 Ex20Ins 突变形式的 EGFR，其效力可与之前公布的常见激活和 T790M 突变体相媲美。与野生型 EGFR 相比，奥希替尼被设计为对常见的激活突变体和 T790M 突变体具有选择性活性。尽管 Ex20Ins 突变体在 ATP 结合位点附近缺乏与 T790M 相关的结构差异，与其他 TKI 相比，奥希替尼的突变选择性特征似乎仍然存在于 Ex20Ins 变体中。TKI 的野生型 EGFR 活性被认为是限制可实现的针对突变 EGFR 靶标的临床暴露的关键因素，因此可能会影响临床获益。因此值得注意的是，虽然阿法替尼在体外对 Ex20Ins 变体同样显示出高水平的磷酸化 EGFR 效力，但与奥希替尼相比，它也同样显示出更高水平的针对 wt-EGFR 的效力。

　　总之，本文介绍的工作提供了与该领域其他已批准 TKI 相比，奥希替尼（osimertinib) 的综合临床前体外和体内评估。与之前的报告一致，我们的数据支持奥希替尼与上一代 TKI 相比具有差异化特征：1)在一系列 Ex20Ins 变体中具有高体外效力，更一致和更有利的 wtEGFR 选择性边际的证据，以及 3) 在临床相关剂量下，在一系列异种移植和 PDX 模型中具有卓越的疗效。尽管需要额外的临床前研究来进一步了解 Ex20Ins 生物学和在这种多样化的突变环境中对 TKI（如奥希替尼）的反应，但这些研究在完全预测临床获益方面存在局限性，而且无法完全概括多种复杂性，例如 PK差异、代谢物贡献、剂量水平等。因此，我们建议需要经验性临床研究来全面评估奥希替尼在不同 Ex20Ins 突变环境中的效力，并为最佳剂量提供信息。微信扫描下方二维码了解更多：