如何预防奥拉帕尼(Olaparib)耐药

　　人类肿瘤异质性通过增加耐药细胞亚群的可能性来促进治疗失败。PARP-1 抑制剂奥拉帕尼（Olaparib）被批准用于 BRCA 突变的卵巢癌，但 BRCA2 回复突变导致功能同源重组修复 (HRR) 和奥拉帕尼耐药。为了克服这种耐药性并将 PARP1 抑制作用扩大到具有功能性 HRR 的癌症中，我们开发了一种反义策略来使 BRCA2 缺陷群体中的大多数肿瘤细胞呈现出来。我们预测，这种策略将使 HRR 熟练的肿瘤细胞对奥拉帕尼敏感，并防止在 HRR 熟练的异质肿瘤细胞群中出现耐药性。我们报告说 BRCA2 下调使多种人类肿瘤细胞系（但不是非癌人类肾细胞）对奥拉帕尼敏感，并且，与奥拉帕尼结合，增加了人类肿瘤细胞中的非整倍性和染色体易位。在混合的 HRR 精通和 HRR 缺陷细胞群中，奥拉帕尼单药治疗允许产生对后续奥拉帕尼治疗具有抗性的 HRR 精通细胞。BRCA2 抑制和奥拉帕尼联合治疗阻止了 HRR 熟练细胞的选择并抑制了整个群体的增殖。用 BRCA2 siRNA 和奥拉帕尼治疗比单独治疗更有效地降低了小鼠卵巢异种移植物的生长。BRCA2 抑制和奥拉帕尼联合治疗阻止了 HRR 熟练细胞的选择并抑制了整个群体的增殖。用 BRCA2 siRNA 和奥拉帕尼治疗比单独治疗更有效地降低了小鼠卵巢异种移植物的生长。BRCA2 抑制和奥拉帕尼联合治疗阻止了 HRR 熟练细胞的选择并抑制了整个群体的增殖。用 BRCA2 siRNA 和奥拉帕尼治疗比单独治疗更有效地降低了小鼠卵巢异种移植物的生长。BRCA2 反义寡核苷酸的体内使用可能是扩大奥拉帕尼临床应用和预防耐药性的可行选择。

　　PARP1 抑制剂奥拉帕尼（Olaparib）被批准用于治疗 BRCA 突变的卵巢肿瘤。然而，这仅代表癌症患者的一个子集，即使在这一人群中也可能出现耐药性。我们提出了一种新的治疗策略，使用靶向 BRCA2 的 ASO 来抑制 BRCA2 功能，以努力克服临床中 PARP 抑制的这些挑战。在本研究中，我们测试了 BRCA2 ASO 与奥拉帕尼的组合，以确定该组合是否可以：1) 通过使 HRR 熟练的 BRCA2 阳性肿瘤对药物敏感，克服先天耐药性并增加奥拉帕尼的潜在有用性，以及 2)防止混合 HRR 熟练的细胞群中的获得性耐药。

　　我们使用人肺癌、卵巢癌和乳腺癌细胞系表明，BRCA2 ASO 治疗可以克服这些细胞系中对奥拉帕尼的先天耐药性。据报道，没有一个含有 BRCA2 或 BRCA1 突变（COSMIC CCLE 数据库），并且具有能够介导 HRR 的功能性 BRCA2，对奥拉帕尼抑制 PARP1/2 的治疗效果相对具有抗性。因此，BRCA2 ASO 治疗有可能使高比例的肿瘤细胞对奥拉帕尼治疗敏感，这可能会扩大该药物在临床上的实用性和适用性。

　　由于异质肿瘤生态系统中耐药克隆的阳性选择，奥拉帕尼（Olaparib）主要针对 HRR 缺陷肿瘤这一事实也是一个潜在问题。大多数肿瘤表现出复杂的多克隆变异性，来自乳腺肿瘤单核测序的数据表明没有两个肿瘤细胞是相同的。这使得对靶向治疗和化疗的耐药性在数学上不可避免 ，在生物学上非常普遍。已经描述了几种奥拉帕尼耐药机制，包括在 BRCA2 中具有重新激活突变的肿瘤的生长，这使得奥拉帕尼无效。此外，伴随 53BP1 突变的 BRCA1 突变肿瘤细胞不再缺乏 HRR，并且还表现出对 PARP1 抑制的抗性。因此，对于具有 HRR 缺陷的细胞，如果没有任何相应的正选择压力，奥拉帕尼治疗似乎会以高频率失败。

　　我们的体内数据表明，可以将 BRCA2 抑制和奥拉帕尼治疗相结合，以减少动物的肿瘤负担。接受联合治疗的小鼠表现出最少的肿瘤结节和最低的肿瘤重量，相对于对照和每种单一治疗。特别是，ip 模型概括了晚期卵巢癌的几个标志，并且是一种探索治疗潜力的模型，以防止在腹膜腔继发部位形成转移性病变。我们的数据表明，联合 BRCA2 下调和奥拉帕尼（Olaparib）治疗的潜在治疗结果将是防止原发性肿瘤手术切除后腹腔内继发部位的肿瘤扩散和生长。然而，还需要进一步的实验来确定 BRCA2 抑制和奥拉帕尼治疗对荷瘤动物存活率的影响。此外，为了扩大显示非癌症 HK-2 细胞缺乏奥拉帕尼致敏的体外数据，需要使用靶向 BRCA2 小鼠序列的 siRNA进行体内研究，以阐明 BRCA2 抑制对奥拉帕尼敏感性的潜在影响在正常组织中。微信扫描下方二维码了解更多：