卡马替尼(INC280)对厄洛替尼耐药性的影响

　　MET 抑制剂卡马替尼（INC280）恢复了对厄洛替尼的敏感性并促进了非小细胞肺癌模型中的细胞凋亡，这些模型通过肝细胞生长因子对厄洛替尼产生了耐药性。

　　背景

　　尽管表皮生长因子受体 (EGFR) 抑制剂厄洛替尼最初对携带EGFR激活突变的非小细胞肺癌 (NSCLC) 患者有效，但大多数随后会产生获得性耐药。一种公认的耐药机制是通过肝细胞生长因子 (HGF)-MET 途径激活旁路信号传导而发生的。卡马替尼（INC280）是 MET 的小分子激酶抑制剂。我们试图证明 INC-280 作为单一药物和与厄洛替尼联合使用外源性 HGF 来模拟 MET 上调的选定 NSCLC 细胞系的活性。

　　方法

　　四种 NSCLC 细胞系（HCC827、PC9、H1666 和 H358）用单药 INC-280 或与厄洛替尼联合治疗，有或没有 HGF。药物治疗的活性通过细胞活力测定来测量。免疫印迹用于监测H1666、HCC827 和 PC9中 EGFR/pEGFR、MET/pMET、GAB1/pGAB1、AKT/pAKT 和 ERK/pERK 以及细胞凋亡标志物（PARP和 capase-3 裂解）的表达。

　　结果

　　作为单一药剂，INC-280 尽管在低至 10 nM 的浓度下有效抑制 MET 激酶活性，但仍显示出最小的细胞毒性。添加 HGF 可防止厄洛替尼诱导的细胞死亡。将 INC280 添加到 HGF 介导的厄洛替尼耐药模型中，恢复了所有测试细胞系的厄洛替尼敏感性，这与 PARP 和 caspase-3 的裂解相关。在这些模型中，卡马替尼（INC280）处理足以在 HGF 存在下恢复厄洛替尼诱导的 MET、GAB1、AKT和ERK抑制。

　　结论

　　尽管单独使用 MET 抑制剂卡马替尼（INC280）对细胞生长没有明显影响，但它能够恢复对厄洛替尼的敏感性并促进 HGF 导致厄洛替尼耐药的 NSCLC 模型中的细胞凋亡。这些数据为厄洛替尼加INC-280 在EGFR突变的 NSCLC 中进行的 1 期临床试验提供了临床前基本原理。

　　卡马替尼（INC280）是一种新型口服生物可利用的 MET 激酶活性小分子抑制剂。INC280 具有高效能和选择性，已被证明可以在体外和体内模型中阻断 MET 依赖性肿瘤生长和迁移。在这里，我们研究了 INC280 作为单一药剂和与厄洛替尼联合使用对选定 NSCLC 细胞系中 HGF 介导的厄洛替尼耐药性的影响。

　　MET 激活促进了 EGFR TKI 抗性，其特征是 MET 拷贝数异常或 HGF 产生升高，这已被充分证明。HGF表达已经显示到可逆的和不可逆的EGFR TKI的中介电阻以及在NSCLC细胞中的单克隆抗体西妥昔单抗。在这里，我们表明使用口服生物可利用的 MET 抑制剂 INC-280 抑制 MET 信号传导，可以在我们的获得性耐药模型中恢复对厄洛替尼的敏感性。重要的是，我们利用 HGF 刺激来模拟 MET 介导的对厄洛替尼的获得性耐药。这些结果与先前关于 HGF-MET 轴在介导 NSCLC 中厄洛替尼耐药性中的作用的报告一致。

　　HCC827、PC-9 和 H1666 细胞系对单药厄洛替尼具有最大的生长抑制反应，并且在 HGF 介导的耐药性之后，当用卡马替尼处理时显示出最大的厄洛替尼活性恢复。应该强调的是，作为单一药剂，INC-280 对细胞生长、信号转导或细胞凋亡几乎没有可观察到的影响。INC-280 显示功效的唯一背景是恢复厄洛替尼在 HGF 导致抗性的细胞中的活性。因此，仅仅存在 MET 蛋白（在所有测试的细胞系中都存在）似乎不是 MET 依赖性的可靠指标，至少在培养中是这样。

　　这里描述的工作具有重要的临床意义。EGFR TKIs（如厄洛替尼）在治疗EGFR突变型 NSCLC 方面的成功代表了治疗性肿瘤学的真正突破之一；然而，抵抗的出现是普遍的。随着美国食品和药物管理局批准第三代 EGFR TKI 奥希替尼成功靶向 T790M“守门人”突变，未来的耐药机制可能会越来越多地利用旁路途径，如人类表皮生长因子受体 2 (HER-2) 或 MET 激活逃避EGFR抑制。这强调需要确定可与 EGFR TKI 联合部署的选择性和强效药物。我们的结果表明，在适当的临床背景下，使用卡马替尼（INC280）的 MET 导向治疗可以克服由 HGF-MET 信号传导激活介导的厄洛替尼耐药性。微信扫描下方二维码了解更多：