他拉唑帕尼talazoparib的体内治疗功效

　　所有动物研究均根据达特茅斯学院的机构动物护理和使用委员会（IACUC）批准的方案进行。为了进行体内治疗效果评估，使用了两种不同长度的塔拉唑帕尼植入物。将单位剂量相同的塔拉唑帕尼制成的植入物切成两个不同的长度，分别为1mm和2mm。由于他拉唑帕尼植入物中的载药量为25μg/mm，因此1和2mm长的植入物分别分别包含25和50μg他拉唑帕尼。　

　　在体内治疗他拉唑帕尼植入物中的基因工程进行的功效BRCA1基因CO/CO2;MMTV-Cre重组;p53的+/-乳腺癌小鼠模型。当肿瘤大小约为直径4-6mm时，开始进行小鼠治疗。使用18G近距离放射治疗涂药针（BardMedical，CovingtonGA）在瘤内施用他拉唑帕尼植入物。对于肿瘤内植入，将塔拉唑帕尼（他拉唑帕尼）植入物预加载到涂药针中，并横向引导至肿瘤中心。　　

　　当从肿瘤中拔出外针（套管）时，通过同时按压探针来弹出植入物。动物皮肤胶被用来密封皮肤上的小孔，以避免植入物从肿瘤中泄漏出来。在研究中使用了四组动物（每组n=6-8只动物）。　　

　　对照组接受瘤内植入空白PLGA植入物（无他拉唑帕尼），通过口服管饲法，用游离的塔拉唑帕尼治疗另外一个对照组，并用单个1mm或2mm长的植入物治疗两个他拉唑帕尼植入物组。口服给予他拉唑帕尼，以与目前的临床治疗方法进行比较。在12天的时间内，每隔一天通过口服管饲法给予等效剂量的游离他拉唑帕尼talazoparib（在2mm长的植入物中）总计六次。　　

　　使用卡尺监测肿瘤大小，每周两次称重小鼠以评估体重减轻。使用以下公式计算肿瘤体积：体积＝长×宽×高/2。如果肿瘤直径超过1cm，肿瘤体积超过体重的10％，或者肿瘤溃烂或干扰活动性，则处死小鼠。为了进行免疫组织化学，收集了肿瘤，固定在中性缓冲福尔马林中，包埋在石蜡中并切成薄片。如前所述，将切片用PCNA（SantaCruz1：200）或γ-H2aX（Abcam1：100）抗体染色3。　　

　　为了确定PCNA-或γ-H2aX阳性细胞的百分比，对每个肿瘤外周的两个切片进行计数（n=4-5/次治疗，每个〜1000个细胞）。将载玻片随机分组，并在计数前除去组标签。详情请扫码咨询：