吉非替尼(Gefitinib)耐药非小细胞肺癌的治疗靶点

　　尽管表皮生长因子受体 (EGFR)-酪氨酸激酶抑制剂 (EGFR-TKI)，包括吉非替尼（Gefitinib），在非小细胞肺癌 (NSCLC) 患者中提供了显着的临床益处，但已知耐药性的获得会限制EGFR-TKI 治疗的疗效。在这项研究中，我们证明了 EGF-EGFR 信号在 NSCLC 细胞迁移中的参与以及 RAC1 在 EGFR 介导的 NSCLC 进展中的要求。我们通过使用 RAC1 的基因沉默或在 EGFR 突变的 NSCLC 细胞中诱导组成型活性 RAC1，显示了 RAC1 通路在细胞迁移或片状伪足形成中的重要作用。重要的是，RAC1 抑制抑制了 EGFR 突变 NSCLC 细胞的体外迁移和生长，以及体内生长即使在吉非替尼耐药细胞中。此外，RAC1 抑制的这些抑制是通过 MEK 或 PI3K 独立机制介导的。总的来说，这些结果为通过靶向 RAC1 通路克服 NSCLC 患者对 EGFR-TKI 的耐药性来控制癌症进展开辟了新的机会。

　　非小细胞肺癌 (NSCLC) 占肺癌的近 80%，转移性 NSCLC 的中位生存期仅为 1 年左右，即使采用铂类化疗。替代疗法是分子靶向治疗，如作为表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI），突变EGFR在NSCLC患者的约50％过表达，并且还已知与肿瘤生长和差相关联。此外，在大约 10% 的 NSCLC 中观察到导致异常激活的特定 EGFR 突变（例如 ΔE746-A750 和 L858R）。目前的 III 期临床研究也表明，在无进展生存期方面，EGFR-TKI 作为一线治疗比其他化疗的联合治疗更有益，尤其是在携带 EGFR 突变的 NSCLC 患者中。尽管有如此明显的临床益处，但 EGFR 靶向治疗现在面临着长期治疗后获得性耐药的问题，这些问题是由继发性突变机制，如 EGFR T790M、MET 扩增或肝细胞生长因子 (HGF) 过度表达。

　　在这项研究中，我们确定了 RAC1 对表达 EGFR 突变的 NSCLC 细胞系 PC-9 细胞中细胞迁移和生长的重要性。重要的是，小分子 RAC1 抑制剂 NSC23766 甚至可以在体外有效抑制吉非替尼耐药的 RPC-9 和 PC-9 HGF 细胞中的细胞迁移和生长，并在体内抑制吉非替尼耐药的 NSCLC 肿瘤生长，这意味着 RAC1 抑制是吉非替尼耐药 NSCLC 的有吸引力的治疗靶点。

　　包括吉非替尼（Gefitinib）在内的几种 EGFR-酪氨酸激酶抑制剂 (EGFR-TKI) 已被批准用作 EGFR 突变 NSCLC 的分子靶向抗癌药物，预计将为 NSCLC 患者提供显着的临床益处。尽管 NSCLC 患者对 EGFR-TKI 有实质性反应，但存在一个临床障碍，即表达 EGFR-TKI 的突变型 NSCLC 经常通过继发性 EGFR 突变、HGF 过表达或 MET 扩增获得对 EGFR-TKI 的耐药性，因此限制了 EGFR-TKI 的疗效。因此，确定一种替代策略来抑制吉非替尼耐药 NSCLC 中的肿瘤生长和转移，以建立一种针对 EGFR-TKI 耐药的新治疗方法至关重要。类似于在肿瘤生长的抑制其有限的功效，我们观察到吉非替尼（Gefitinib）对细胞迁移在耐吉非替尼的NSCLC细胞有限影响，表明 EGFR 介导的信号除了提供生长信号外，还调节 PC-9 细胞中的细胞运动。重要的是，我们清楚地证明了 RAC1 抑制剂 NSC23766 不仅能够抑制亲本吉非替尼敏感的 PC-9 细胞中的细胞迁移和增殖，而且能够抑制吉非替尼（Gefitinib）抗性细胞中的细胞迁移和增殖。此外，NSC23766 可以在体内抑制吉非替尼耐药的 NSCLC 肿瘤生长。这些结果强烈支持 RAC1 是抑制 NSCLC 患者肿瘤进展以克服对 EGFR-TKI 耐药性的有吸引力的靶标。

　　我们的结果还表明 RAC1 介导的信号通路独立于 EGFR 介导的其他下游通路，例如 PI3K-Akt 通路或 MEK1/2-ERK1/2 通路，它们似乎不参与PC-9 细胞的细胞迁移。因此，我们推测 EGF-EGFR 信号通路直接通过 RAC1 活性增强细胞迁移。在敲除 RAC1 或通过蛋白质印迹处理 RAC1 抑制剂后，我们还可以检测到 Akt 和 ERK1/2 磷酸化没有变化。鉴于即使在 MEK 抑制剂和 PI3K 抑制剂存在的情况下，RAC1 抑制剂也显示出进一步的生长抑制。靶向 RAC1、MEK 和 PI3K 的多种激酶抑制可能是一种有吸引力的策略，可以互补地抑制 NSCLC 细胞（包括对 EGFR-TKI 具有抗性的细胞）的生长和转移。微信扫描下方二维码了解更多：