他达拉非（adalafil）的血浆浓度通过LC-MS / MS定量，使用配备了Agilent 1260系列（Agilent Technologies，Santa Clara，CA，USA）和API 2000 MS / MS系统的仪器进行。电喷雾电离界面产生正离子[MH]+。物在Zorbax SB下进行的HPLC色谱分离18柱（50×4.6毫米，5微米）与PHENOMENEX保全墨盒（C18，4.0×3.0毫米，Macclesfield的柴郡，UK）。
流动相成分是乙腈-10 mM甲酸铵缓冲液的混合物（70：30，v/v，pH值，使用甲酸的pH 3.0），流速为300μL/ min。色谱柱和自动进样器分别设置为30和10°C。使用多反应监测（MRM）模式在tadalafil的m/z390.1→268.2和IS的m/z475.3→100.0的跃迁下检测分析物。他达拉非的碰撞能量，去簇和碰撞退出电势分别设置为17 V，76 V和12 V，IS的碰撞能量为31 V，91 V和10V。离子喷雾电压和进入电势分别设置为5500和10V。分析物的停留时间为150 ms。使用Analyst 1.4.1软件处理数据。
通过蛋白质沉淀从血浆基质中提取他达拉非和IS。在Eppendorf管中®，乙腈含有600μl的（500毫微克/毫升）加入到一个100μL-血浆样品。涡旋混合并在12,000 rpm下离心5分钟后，将等分的上清液（300μL）转移到自动进样瓶中，并将5μL样品注入LC-MS / MS系统。方法验证是根据美国食品和药物管理局生物分析方法验证指南进行的，他达拉非的线性度在1–1000 ng / mL之间。该方法的日内和日间精度（n= 5）为4.2-11.8％，日内和日间精度（n= 5）是89.7–110.2％。短期（室温6小时），提取后（4°C 24小时），冻融（三个周期后为-70°C）和长期稳定性（-1个月为-70°C） ）足够。使用相同的程序进行药代动力学样品。
使用WinNonlin Standard Edition软件5.2版（Pharsight Corp.，Mountain View，CA，USA）评估非房室药代动力学分析。使用线性梯形方法评估从0到36 h（AUC36h）的血浆浓度与时间曲线下的面积，并将其外推至无穷大（AUCinf）。他达拉非的最大血浆浓度和达到Cmax的时间直接从各个观察数据中获得。终端相消除速率（λž）用在该终端相所观察到的血浆浓度点的对数线性回归估算，和消除半衰期（吨1/2）计算为0.693 /λž。表观总清除率（Clt/ F）和分布体积（Vz/ F）分别使用以下公式计算：剂量/ AUCinf和剂量/。更多关于他达拉非的价格可咨询下方微信。
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