鲁索替尼(Ruxolitinib)减轻输尿管梗阻小鼠的肾间质纤维化

　　鲁索替尼（Ruxolitinib）是 Jak1/2 的选择性抑制剂。Jak 的下游信号通路，如 Stat3 和 Akt/mTOR，被过度激活并导致肾间质纤维化。因此，我们探讨了鲁索替尼对这一病理过程的影响。本研究采用单侧输尿管梗阻 (UUO) 模型和 TGF-β1 处理的成纤维细胞和肾小管上皮细胞。Ruxolitinib 被施用于 UUO 小鼠和 TGF-β1 处理的细胞。与未接受 Ruxolitinib 治疗的小鼠相比，接受 Ruxolitinib 治疗的 UUO 小鼠的肾脏显示出较少的肾小管损伤。鲁索替尼（Ruxolitinib）治疗抑制了 UUO 肾脏和 TGF-β1 处理的成纤维细胞中的成纤维细胞活化和细胞外基质 (ECM) 的产生。Ruxolitinib 治疗还阻断了 UUO 肾脏和 TGF-β1 治疗的肾小管上皮细胞中的上皮间质转化 (EMT)。此外，鲁索替尼治疗减轻了 UUO 诱导的炎症、氧化应激和细胞凋亡。从机制上讲，鲁索替尼治疗减弱了 Stat3 和 Akt/mTOR/Yap 通路的激活。总之，鲁索替尼治疗可以改善 UUO 诱导的肾间质纤维化，表明鲁索替尼可能用于治疗纤维化肾病。

　　表达 α-SMA 的活化成纤维细胞通常被称为肌成纤维细胞。肌成纤维细胞产生 ECM；因此它们对器官纤维化至关重要。LeBleu 及其同事的研究表明，在 UUO 肾脏中，50% 的肌成纤维细胞通过增殖起源于局部驻留的成纤维细胞，35%、10% 和 5% 的肌成纤维细胞分别起源于骨髓分化、内皮-间质转化和 EMT。我们的研究表明，鲁索替尼治疗降低了 UUO 肾脏和 TGF-β1 处理的 NRK-49F 细胞中 α-SMA 的表达，并且始终如一地，鲁索替尼治疗导致 ECM 产生减少；此外，鲁索替尼治疗干扰了 TGF-β1 诱导的 NRK-49F 细胞增殖。总之，这些发现表明鲁索替尼（Ruxolitinib）具有抑制成纤维细胞活化或肌成纤维细胞生成的潜力。

　　由于肾小管上皮细胞 EMT 有助于 UUO 诱导的肾间质纤维化，我们观察到鲁索替尼对 E-钙粘蛋白表达的影响。正如预期的那样，UUO 导致 E-钙粘蛋白表达降低，这在 Ruxolitinib 治疗中部分恢复。此外，鲁索替尼治疗阻断了 NRK-52E 细胞中 TGF-β1 诱导的 E-钙粘蛋白下调。转录因子蜗牛和扭曲已被证明参与肾小管上皮细胞 EMT。我们的研究表明，鲁索替尼处理抑制了 UUO 肾脏和 TGF-β1 处理的 NRK-52E 细胞中的蜗牛和扭曲上调。然而，Pang 及其同事的研究表明，特定的 Stat3 抑制剂 S3I-201 对 UUO 诱导的蜗牛过度表达没有影响。这些发现表明鲁索替尼（Ruxolitinib）抑制蜗牛上调独立于 Stat3。

　　UUO肾脏过量的趋化因子及其受体。这些趋化因子负责募集炎症细胞，当这些细胞被激活时，会产生更多的细胞因子来维持和增强炎症。MCP-1巨噬细胞募集到肾间。我们的研究表明，鲁索替尼治疗降低了 MCP-1 表达以及阻塞肾脏中的巨噬细胞浸润。相反，S3I-201 对 Stat3 的阻断未能抑制 UUO 诱导的 MCP-1 上调，但仍减少巨噬细胞浸润，表明其他细胞因子参与巨噬细胞募集。除了生长因子如 TGF-β1，细胞因子如 IL-6 也有助于成纤维细胞活化和纤维化。最近的一项研究表明，IL-6 的阻断改善了 UUO 诱导的纤维化。

　　几个因素已被确定以诱导肾小管上皮细胞的凋亡，包括机械拉伸，血管紧张素II，TGF-β1和Fas / FasL系统和氧化应激。在我们的研究中，治疗鲁索利替尼降低TNF-α，其显示出刺激细胞凋亡的UUO肾脏的表达。此外，鲁索替尼治疗减弱了氧化应激反应。已经表明，UUO 会损害肾脏抗氧化酶的激活。鲁索替尼（Ruxolitinib）治疗恢复了受阻肾脏中的 T-SOD 水平，并始终如一地减轻了 UUO 诱导的细胞凋亡。

　　我们的研究最终确定鲁索替尼治疗减弱了 Akt/mTOR 通路。mTOR 复合物 1 (mTORC1) 和 mTORC2 在 UUO 肾脏中均被激活。此外，发现 Yap 可介导 mTORC2 诱导的肾间质纤维化。越来越多的证据表明 Yap 在肾脏中起到促纤维化因子的作用，靶向 Yap 可改善肾间质纤维化。鲁索替尼（Ruxolitinib）治疗抑制了 UUO 肾脏中 Yap 的表达，进一步表明 Akt/mTOR/Yap 是 Ruxolitinib 的潜在靶标信号。

　　总之，鲁索替尼治疗减轻了 UUO 肾脏的炎症和氧化应激，并抑制了 UUO 肾脏和体外培养细胞中的成纤维细胞活化、肾小管细胞 EMT 和 ECM 的产生。从机制上讲，鲁索替尼治疗阻断了 UUO 或 TGF-β1 诱导的 Stat3 和 Akt/mTOR/Yap 通路的激活。这些发现表明 鲁索替尼（Ruxolitinib）治疗可以改善 UUO 诱导的肾间质纤维化，并表明鲁索替尼（Ruxolitinib）可能用于治疗纤维化肾病。微信扫描下方二维码了解更多：