如何增强来那替尼(neratinib)的活性

　　NSCLC 肿瘤对阿法替尼产生耐药性的患者目前几乎没有有效的治疗选择来延长其生存期。阿法替尼耐药的 NSCLC 细胞对临床相关浓度的不可逆泛 HER 抑制剂来那替尼敏感，但对第一代 ERBB1/2/4 抑制剂拉帕替尼不敏感。在多个阿法替尼耐药的 NSCLC 克隆中，HDAC 抑制剂降低了 ERBB1/3/4 的表达，但激活了 c-SRC，导致 ERBB1/3 磷酸化的总水平更高。来那替尼（neratinib）也迅速降低了表达ERBB1/2/3/4、c-MET和突变体K-/N-RAS的；K-RAS 与磷酸化的 ATG13 和囊泡中的组织蛋白酶 B 共定位。细胞与 [neratinib + HDAC 抑制剂] 的联合暴露导致 mTORC1 和 mTORC2 失活，增强自噬体和随后的自体溶酶体形成，并导致细胞死亡的附加诱导大于附加诱导。敲除 Beclin1 或 ATG5 可阻止 HDAC 抑制剂或来那替尼降低 ERBB1/3/4 和 K-/N-RAS 表达并降低 [来那替尼 + HDAC 抑制剂] 的致死率。来那替尼（neratinib）和 HDAC 抑制剂通过自噬降低多种 HDAC 蛋白的表达，这是导致 PD-L1、PD-L2 和鸟氨酸脱羧酶表达降低以及 I 类 MHCA 表达增加的原因。体内，来那替尼和 HDAC 抑制剂相互作用以抑制 4T1 乳腺肿瘤的生长，抗 PD-1 抗体增强了这种作用。我们的数据支持以下前提：HDAC 抑制剂可以增强来那替尼的致死率，来那替尼可能是阿法替尼耐药 NSCLC 的有用治疗工具，并且[来那替尼 + HDAC 抑制剂] 暴露促进抗肿瘤免疫反应。

　　本研究旨在进一步研究来那替尼（neratinib）单独或与其他药物联合使用的活性。本手稿中的主要发现是临床相关浓度的来那替尼可杀死阿法替尼耐药的 NSCLC 细胞，并且 HDAC 抑制剂可以增强这种致死率。此外，来那替尼 / HDAC 抑制剂联合治疗增强了肿瘤细胞的免疫原性特征，这可能表明剩余肿瘤细胞对免疫治疗药物（如免疫检查点抑制）的敏感性。

　　除了这些研究的主要目标之外，我们还证实，来那替尼（neratinib）与阿法替尼或拉帕替尼一样有效，可提高先前建立的 [培美曲塞 + 索拉非尼]、[瑞戈非尼 + 西地那非]、[来那替尼 + 达沙替尼] 的药物组合的致死率和 [鲁索替尼 + 来那替尼]。这些组合还改变了免疫调节蛋白的表达，因此可以预测这些药物组合可以与检查点免疫疗法抗体协同作用。基于之前的研究，来那替尼增强[培美曲塞+索拉非尼]体内抗肿瘤功效的能力趋于大于阿法替尼的能力。我们目前正在制定一项方案，以在 2018 年联合 [培美曲塞 + 索拉非尼 + 来拉替尼] 进行三药全实体肿瘤 I 期试验。

　　我们研究中的一个意外观察结果是，来那替尼（neratinib）通过自噬依赖性过程导致 ERBB1、ERBB3、ERBB4 和 c-MET 分解。众所周知，ERBB1 配体 EGF 和 TGFα 对受体的信号传导、内化和再循环有不同的调节。EGF 在酸性内体环境中仍然附着在 ERBB1 上，这导致最初的信号反应延长，但随后导致受体降解。另一方面，TGFα 与内化的 ERBB1 分离，导致受体失活和受体再循环到细胞表面。这些过程也会导致细胞对 EGF 暴露的不同生物学反应。用 0.1-0.5 ng/ml EGF 处理的鳞状 A431 癌细胞增殖；用 1-2 ng/ml EGF 生长停滞处理的细胞；用 5-10 ng/ml EGF 处理的细胞在 24 小时内发生凋亡。来那替尼诱导受体酪氨酸激酶内化和降解的确切机制目前尚不清楚。ERBB1/2/4 特异性抑制剂降低了不受来那替尼催化抑制的受体 c-MET 和不结合 ATP 的激酶死亡受体 ERBB3 的表达，认为 ERBB1/2/ 4 必须在质膜中引发地震事件，其中不仅 ERBB 家族受体被内化，而且“同路人”受体酪氨酸激酶也被引导至溶酶体降解。

　　来那替尼（neratinib）作为单一药物降低了 HDAC6 的表达并增强了 Beclin1 的表达，这些作用被丙戊酸盐放大。来那替尼还降低了 HDACs2/4/10 的表达，这表明来那替尼依赖的 HDAC10 水平降低将直接影响免疫治疗生物标志物的表达。微信扫描下方二维码了解更多：