肝癌对索拉非尼/多吉美治疗耐药的潜在机制

　　索拉非尼（多吉美）是一种多激酶抑制剂，是晚期肝细胞癌（HCC）患者的少数全身治疗选择之一。对索拉非尼的耐药性发展频繁，并且可以由烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）依赖性脱乙酰酶沉默调节蛋白（SIRT）介导。我们旨在测试索拉非尼的疗效是否受到细胞NAD水平和NAD依赖性SIRT1功能的影响。我们分析了索拉非尼对过表达SIRT1或补充了NAD代谢产物烟酰胺单核苷酸（NMN）的HCC细胞系的凋亡诱导，NAD拯救，线粒体功能和相关信号通路的影响。用索拉非尼剂量依赖性治疗HCC细胞系可诱导凋亡，并显着降低细胞NAD浓度。

　　SIRT1蛋白在HUH7细胞中下调，但在Hep3B细胞中不下调。索拉非尼治疗后，通透性细胞的线粒体呼吸作用降低，柠檬酸合酶活性减弱，细胞三磷酸腺苷（ATP）水平降低。索拉非尼治疗伴随单磷酸腺苷（AMP）激活的蛋白激酶（AMPK）磷酸化增加，导致雷帕霉素（mTOR）的机械靶标活性降低，表明能量缺乏。 SIRT1的瞬时过表达以及NMN对NAD的补充减少了索拉非尼诱导的细胞凋亡。因此，我们可以得出结论，索拉非尼会影响NAD/SIRT1 / AMPK轴。 SIRT1的过表达可能是肝癌对索拉非尼治疗耐药的潜在机制。多激酶抑制剂索拉非尼是晚期肝细胞癌（HCC）的少数几种全身治疗选择之一，并通过阻止快速加速的肝癌发挥其抗增殖和血管生成作用。

　　纤维肉瘤（RAF）和血管内皮生长因子（VEGF）信号传导，有望为晚期肝细胞癌患者提供更好的生存。索拉非尼还被证明可减弱HCC细胞的线粒体功能。但是，并非所有患者对索拉非尼都有反应。通过靶向代谢途径使HCC细胞对索拉非尼治疗敏感已被证明是为晚期HCC患者开发新治疗选择的一种有前途的方法。在55％的HCC患者中过表达，这与更高的肿瘤等级和较差的长期存活率有关。 SIRT1可以调节对于肿瘤发生很重要的蛋白质的活性，因此，它支持肿瘤的增殖和发展以及耐药性。 SIRT1是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）依赖性脱乙酰基酶。

　　由于代谢改变，癌细胞对NAD的需求更高，作为细胞能量代谢反应中的氧化还原伴侣。 NAD依赖性酶（例如SIRT1）调节癌细胞生长所需的关键细胞过程，包括转录，细胞周期进程，抗凋亡和DNA修复。为了为癌细胞提供足够的NAD，许多类型的肿瘤都会过表达烟酰胺酰胺磷酸核糖基转移酶（NAMPT），这是哺乳动物NAD抢救的关键酶。在以前的研究中，我们可以证明通过其特异性抑制剂FK866抑制NAMPT活性会诱导能量应激，导致HCC细胞凋亡，这与单磷酸腺苷（AMP）激活的蛋白激酶（AMPK）介导的机制相关雷帕霉素（mTOR）信号的靶标。

　　根据我们的数据，并考虑到SIRT1可能与其抗肿瘤剂脱乙酰化的能力有关，在耐药性中发挥作用，目前的研究旨在确定索拉非尼是否会影响NAMPT / SIRT1 / AMPK信号传导途径和能量代谢。我们假设抑制SIRT1支持肝癌细胞系中的凋亡。我们可以证明索拉非尼治疗HCC细胞会导致线粒体功能障碍，并降低NAD和三磷酸腺苷（ATP）水平。这与AMPK的激活和随后的mTOR信号传导的抑制有关。尽管SIRT1抑制不能使肝癌细胞系对索拉非尼敏感，但SIRT1的过度表达导致索拉非尼治疗后通过增加p53的脱乙酰作用来降低凋亡，因此可能是HCC细胞获得索拉非尼耐药性的潜在机制。这项研究中使用的肝癌细胞系HUH7，Hep3B和HepG2细胞用浓度范围从0到10 μM的索拉非尼刺激了24小时。分析了细胞外信号调节激酶（ERK），快速加速纤维肉瘤（RAF），细胞活力，凋亡和乳酸脱氢酶（LDH）释放的下游目标的磷酸化。用5 μM索拉非尼刺激后，ERK的磷酸化降低。索拉非尼通过细胞减少。这么看来索拉非尼的效果针对肝癌非常不错，更多详情可咨询下方微信。