infigratinib和瑞博西尼ribociclib的前期联合治疗中获得更大的益处

　　肝细胞癌仍然是全球癌症相关死亡的主要原因之一，但近20年来，系统性治疗方案没有显着改善。放射治疗的进步在一定程度上改善了治疗结果，但这主要限于局部肿瘤。近年来，随着类似的白血病治疗策略取得成功，靶向癌症干细胞诱导终末分化引起了人们的兴趣。在本研究中，我们检查了infigratinib诱导HCC分化的潜力，并探索了与ribociclib联合治疗以降低耐药性和实现长期反应的潜力。　　

　　FGFRs是酪氨酸激酶家族的成员，它们的失调已被证明在肝癌发生中起关键作用。据报道，FGFR2和FGFR3的水平与较差的肿瘤分化密切相关。与我们之前的研究一致，用infigratinib治疗表达FGFR的HCC模型导致FGFR活性的抑制、肿瘤生长的抑制、细胞增殖的抑制、血管正常化的诱导和肿瘤缺氧的减少。由于FGFR家族的过度表达与增加的干性，我们试图确定阻断该信号通路是否会导致细胞分化。我们证明了infigratinib以FGFR依赖性方式有效诱导HCC细胞分化。肿瘤失去了它们的肿瘤组织学特征，如高有丝分裂指数、大核仁和色素沉着过度，并表现出细胞质/核比的显着增加。分化的肿瘤细胞是p-组蛋白3Ser10阴性，与其细胞增殖率降低一致。Infigratinib治疗的FGFR依赖性肿瘤中的所有分化标志物（CYP3A4、HNF4α和白蛋白）与其在载体治疗的肿瘤中的水平相比显着增加。这表明肿瘤细胞能够恢复到休眠状态。临床上，与那些表现出较低水平这些分化标志物的患者相比，具有较高CYP3A4、HNF4α和白蛋白水平的HCC患者显示出更好的5年OS和PFS，支持infigratinib介导的分化治疗在HCC中的潜力。　　

　　分化治疗的概念是将癌细胞保持在休眠状态，而不是完全根除它们。因此，我们研究了长期infigratinib治疗的可行性。尽管显示出初始反应，但我们观察到在长期使用infigratinib治疗后出现耐药菌落，这与之前的报告一致。然而，导致对infigratinib获得性耐药的分子机制尚未确定。在这项研究中，我们观察到这些抗性细胞显示出参与细胞周期各个阶段的蛋白质上调，例如Cdc25C、细胞周期蛋白E2、细胞周期蛋白B1、细胞周期蛋白D1和p-Cdc2。这也与Rb和p-Rb的上调有关。细胞周期蛋白D1-CDK4/6复合物、细胞周期蛋白E2-Cdk2复合物和高度磷酸化的p-Rb随后释放E2F转录因子，最终驱动S期相关基因的表达。值得注意的是，如HNF4α的表达所示，这些抗性肿瘤的一个亚群仍然保留了分化能力，这表明细胞分化是一个可塑性过程，而不是单向过程。　　

　　在此观察的基础上，我们假设使用ribociclib抑制细胞周期途径可以克服infigratinib耐药性。临床上，ribociclib是细胞周期蛋白D1/CDK4/6的抑制剂，常用于治疗激素受体阳性乳腺癌。事实上，添加ribociclib可促进肿瘤细胞分化，逆转对infigratinib的耐药性并显着延长infigratinib的细胞抑制作用。此外，在用药物组合治疗的任何动物中均未观察到毒性证据，这由所有治疗组的相似体重表明。　　

　　从机制上讲，ribociclib治疗似乎也略微上调了一些HCC细胞系中的FGFR，表明存在一种反馈机制，迫使细胞依赖FGFR途径继续增殖。免疫组织化学分析显示，用ribociclib和infigratinib的组合处理的细胞显示出更完全的细胞分化，如CYP3A4和白蛋白等分化标志物的表达增加所证明的那样。此外，发现染色更均匀，几乎没有检测到耐药性结节。此外，p-组蛋白H3Ser10阳性细胞的数量显着减少，这与终末分化细胞增殖较少的观点一致。单独的Infigratinib治疗已被证明可以使瘤内血管正常化，并且在添加ribociclib后这种效果得以维持。然而，单独使用ribociclib治疗并没有显示出这种血管重塑作用。这表明infigratinib和ribociclib之间的协同作用可以部分解释为ribociclib向肿瘤的递送增加，并由功能更强大的血管网络促进。　　

　　总之，我们的数据表明infigratinib对FGFR1-3的抑制导致细胞分化的诱导，从而减少细胞增殖。典型地，阻断FGFR信号导致Ras/Raf/Mek/Erk和PI3K/Akt/mTOR通路减弱，导致参与癌症干细胞的蛋白质表达减少。随着肝细胞对infigratinib产生抗性，它们显示出类似于癌症干细胞的去分化形态。这些细胞的特征是分化标志物的丢失和参与细胞周期的蛋白质（如CDK4）的增加，导致Rb失活。然而，这通过添加ribociclib得到缓解，其中两种药物的组合能够协同阻断补偿信号机制，这些发现强调了恢复HCC细胞分化表型对于抑制肿瘤是必不可少的。最近一项infigratinib的I期临床试验显示出良好的结果，因此我们的研究需要进一步的临床调查，以确定患者是否可以从infigratinib和瑞博西尼ribociclib的前期联合治疗中获得更大的益处。详情请扫码咨询：