关于他达拉非Tadalafil的药代动力学研究说明

　　对于药代动力学研究，他达拉非（Tadalafil）以行为研究中使用的最高剂量（即20 mg / kg腹膜内）给药。在他达拉非给药后30、60、90、120和240分钟，通过断头处死小鼠。快速收集大约1 ml的血液样本，收集到Eppendorf管中，并在室温下凝结。随后，将它们以3000xg离心10分钟，并将血清收集到聚乙烯试管中。同时，将大脑从头骨上移开，并用0.9％NaCl洗涤。将样品保持在− 25°C直至分析。

　　通过具有荧光检测的HPLC方法在小鼠血清（100μl）和脑匀浆（1 ml）中测量他达拉非。用组织匀浆器TH220（美国弗吉尼亚州沃伦顿的奥姆尼国际公司）在蒸馏水（1：4，w/v）中将大脑匀浆。使用二氯甲烷从血清和脑匀浆中提取。提取前，所有样品均加有用作内部标准品（IS）的阿戈美拉汀溶液（500 ng / ml）并加有0.1 mol / l Na2CO3碱化血清样品，而将1 ml浓NaCl（20 g / 100 ml）添加到脑匀浆中，并将样品涡旋15 s。

　　加入萃取试剂后，将样品振摇20分钟（IKA VXR Vibrax，德国），并以1000×g离心持续15分钟（Universal 32，德国海蒂诗）。将有机层转移至锥形管中，并在温和的氮气流下于37°C蒸发至干。将残留物溶于100μl甲醇中，并将20μl此溶液注入由L-2130泵，L-2200自动进样器，L-2485荧光检测器，和L-2350柱温箱。EZChrome Elite v。3.2（Merck Hitachi）软件用于数据采集。分离在使用相同填充材料的100RP-18色谱柱（250×4 mm，5μm）和LiChroCART保护柱（4.0×4.0 mm）（德国默克）上进行。流动相由乙腈和水以45:55（v/v比率），以0.7毫升/分钟的流速泵送。

　　柱箱温度保持在35℃。检测器的激发和发射波长分别设置为281和330 nm。在这些条件下，他达拉非的保留时间为8分钟，IS的保留时间为10.1分钟。没有观察到来自生物基质的干扰峰。通过绘制分析物与IS的峰面积比与分析物相应浓度的关系来绘制校准曲线，并且在测试浓度范围内它们是线性的。血清的定量限为10 ng / ml，脑匀浆的定量限为25 ng / g。该测定具有可重复性，且日间和日间变化低（CV小于10％）。现在他达拉非的价格是多少？更多详情可咨询下方微信。