依维莫司影响索坦/舒尼替尼耐药肾癌的血管源性拟态

　　血管生成是透明细胞肾细胞癌变的标志。抗血管生成疗法已经成功地改善了疾病的结果;然而，大多数接受抗血管生成药物治疗的患者最终会好转。在这项研究中，我们报道了透明细胞肾细胞癌与小鼠和人的血管源性模拟有关，肿瘤细胞在肿瘤血管附近表达内皮标记物。我们证明索坦/舒尼替尼能有效地靶向血管生成拟态，但最终与肿瘤耐药和更具有侵袭性的体内外表型有关。我们在小鼠中再次研究了这些耐药肿瘤，发现与索拉非尼和阿西替尼相比，依维莫司二线治疗特别影响血管生成模拟和肿瘤细胞分化。最后，我们的研究结果强调了舒尼替尼反应和进展过程中肿瘤细胞和微环境水平的表型和基因型变化，以及二线治疗对当前肾细胞癌治疗范式的后续改善。

　　VEGFR-TKI索坦/舒尼替尼是转移性ccRCC患者推荐和常用的一线治疗方法。然而，大多数接受舒尼替尼治疗的转移性ccRCC患者最终会产生耐药性，并随后经历疾病进展。在这项研究中，我们建立了体外和体内舒尼替尼耐药RCC模型，以研究与舒尼替尼耐药相关的表型和基因型变化，特别关注肿瘤细胞分化和依维莫司在挑战耐药细胞中的疗效。

　　在移植肾细胞癌中，索坦/舒尼替尼敏感肿瘤，即由舒尼替尼控制生长的肿瘤，与微血管密度降低、缺氧增加和中央坏死有关。这些表型与临床观察到的表型高度一致。在舒尼替尼耐药的肿瘤中，即在舒尼替尼治疗下进展的肿瘤中，血管生成得以恢复，微血管密度增加，同时减少缺氧和坏死。有趣的是，虽然新的血管模型通常来自异种移植的小鼠基质细胞，但我们发现，在舒尼替尼治疗期间进展的肿瘤中，人CD31的mRNA和蛋白表达高于对舒尼替尼有反应的肿瘤。由于CD31是一种内皮标记物，这一观察结果表明，有些内皮细胞实际上可能来源于人类癌细胞，因为它们是移植到裸鼠体内的人类物质的唯一来源。为了进一步研究这一现象，我们证明进展性肿瘤(对照和舒尼替尼耐药肿瘤)的血管呈现非典型混合表型，表达人和小鼠CD31和人FvW (FvWhs)。CD31或CD10与FvWhs共染色显示，这些人内皮标记物均由肿瘤细胞表达，且仅在肿瘤血管附近表达，这解释了这些肿瘤血管的非典型混合表型。

　　这一发现符合最近的一项研究的结果,表明内皮细胞分化的恶性胶质瘤干细胞样细胞和建议癌症干细胞样细胞的能力直接导致肿瘤血管化通过分化成内皮细胞可能代表一种新的血管生成机制。这种机制被称为血管生成拟态，也可能代表了癌干样细胞向内皮系的不完全分化，正如保留CD10肾脏标记物的非典型混合表型所表明的那样。一些作者还认为这些混合表型可能是细胞融合的结果，而不是细胞分化命运的改变。血管生成拟态已被证明在肿瘤进展中发挥作用，并已在多种肿瘤类型中检测到，包括乳腺癌、前列腺癌和卵巢癌。在一个乳腺癌异种移植模型中，血管生成拟态与新生血管相关，同时可由缺氧诱导，并与卵巢癌细胞模型中CD147(基质金属蛋白酶诱导剂)的表达相关。我们的体外和体内研究结果表明，血管生成拟态可能存在于非高缺氧的RCC肿瘤中，在体内对照肿瘤中显示约30%的缺氧区域。在体外，RCC细胞形成假管的能力类似于内皮细胞HUVEC，这也表明，除了缺氧外，持续的舒尼替尼暴露和VHL突变可能会诱导或增强血管生成模拟。尽管由于在肾癌患者进展时获取连续样本的复杂性，我们的临床经验仍然有限，但我们的临床数据显示，CD31/ cd10染色的肾癌细胞可以在50%以上的RCC患者的原发肿瘤中发现，以及一些在舒尼替尼治疗下进展而对舒尼替尼有反应的患者缺席的患者。然而，这一后期的观察结果应进一步证实在同一患者肿瘤中，以排除可能来自特定肿瘤背景的差异。有趣的是，考虑到舒尼替尼反应性肿瘤中没有表达内皮标记物的肿瘤细胞，我们的研究结果表明，舒尼替尼特别影响这一细胞群体，无论是通过改变癌细胞分化还是特定的内皮细胞毒性发生，正如一些作者所指出的。

　　总之，我们证明，在索坦/舒尼替尼治疗期间，肿瘤进展维持高水平的血管生成，这表明可能激活了其他促血管生成途径。我们发现，肿瘤分化包括血管生成拟态、间质合作增加、自主的前肿瘤基因表达与良好的肿瘤微环境相结合，可能是肿瘤耐舒尼替尼的必要条件。与索拉非尼和阿西替尼相比，依维莫司减缓了这些索坦/舒尼替尼耐药肿瘤的进展，肿瘤生长抑制与缺氧和坏死增加、血管新生减少和特定的基因表达模式有关。微信扫描下方二维码了解更多：