达克替尼/多泽润和阿法替尼的敏感性

　　为了检测对阿法替尼和达克替尼（多泽润）的敏感性，一组人膀胱癌细胞系通过其基因拷贝数，基因突变和HER家族基因的表达来表征。只有一个细胞系UC5具有高水平的EGFR扩增能力，其他六个细胞系对EGFR的拷贝数增益却很低。一个细胞系UC18在HER2的拷贝数上获得的增益较低。没有观察到HER3和HER4的基因组扩增或缺失。膀胱癌细胞系5637带有ERBB2 S310F突变，而UC15和UC3在ERBB3中都有错义突变。所有的突变都在基因的编码区域，导致细胞外蛋白质结构域的改变，并被预测会被激活。

　　确定我们的细胞系面板中包含适当的HER家族突变和表达样本后，我们使用这些细胞来测试对阿法替尼和达克替尼的反应。阿法替尼的平均IC50值为0.39至6.14μM。只有两个细胞系UC15和5637对阿法替尼敏感（平均IC50 =0.86μM）。这些细胞在HER2（S310F，5637）或HER3（V104M，UC15）中具有影响细胞外结构域的突变。

　　该结果与临床观察结果一致，即大多数对阿法替尼敏感的肿瘤患者的HER3突变。另一种细胞系UC3在HER3中有突变，但对阿法替尼不敏感。UC3还具有KRAS突变，该突变与晚期肺癌和转移性结肠癌对EGFR抑制剂的耐药性相关。有趣的是，尽管EGFR扩增和过表达，但UC5对阿法替尼并不敏感，这提示仅EGFR扩增可能不足以促进对阿法替尼的敏感性。对细胞系反应的分析表明，与没有突变的细胞相比，具有HER2或HER3突变的细胞之间存在显着差异（p = 0.045）。

　　达克替尼是另一种不可逆的pan-HER抑制剂，通过相似的筛选方法鉴定出，与阿法替尼。这种相似性扩展到在结构建模分析中与突变EGFR分子上相同位点的结合。尽管有这些相似之处，但膀胱癌细胞系对达克替尼的反应与阿法替尼明显不同。阿法替尼的平均IC50值在0.95-13.8μM之间，并显示出较宽的灵敏度范围，这些灵敏度通过k均值聚类分为敏感，中间和耐药组。

　　如所预期的，对阿法替尼敏感的UC15和5637细胞系也对达可替尼敏感。与阿法替尼相反，另外四个细胞系，包括UC5（扩增的EGFR和高EGFR蛋白表达，但无突变）也显示出对达克替尼的敏感性。两种细胞系（UC6和UC13）尽管对HERCOM转录和蛋白质水平表达中等至低表达，但对达科替尼具有敏感性，并且未检测到突变。这些数据证实了我们先前研究的分类，该研究将UC6鉴定为敏感药物，将UC9鉴定为中间药物，将UC3鉴定为对达可替尼具有抗药性。现在达克替尼效果也还是比较不错，更多详情可咨询下方微信。