他拉唑帕尼talazoparib的治疗效果和毒性

　　两种最近批准的PARP抑制剂为brca突变转移性乳腺癌患者提供了一种重要的新治疗选择。PARP抑制剂能显著延长患者的无进展生存期，但常规口服PARP抑制剂受到生物利用度和脱靶毒性的限制，从而影响患者的治疗效果和生活质量。在这里，我们开发了一种新的给药系统，其中PARP抑制剂他拉唑帕尼被包裹在纳米脂质体的双层中，以克服这些限制。　　

　　方法:对纳米他拉唑帕尼进行体内外表征。在brca缺陷小鼠上评价了纳米他拉唑帕尼的治疗效果和毒性。在自发性brca缺陷肿瘤中，进一步研究了NanoTLZ对基因转录和免疫调节的调控作用。　　

　　结果:与生理盐水对照组、空纳米颗粒组和游离他拉唑帕尼组(口服和静脉注射)相比，NanoTLZ显著延长brca缺陷小鼠的总生存时间(p<0.05)。此外，奈诺茨的耐受性优于游离他拉唑帕尼，没有观察到与游离药物相同的显著体重减轻或脱发。经过5次剂量后，nanootlz改变了140多个基因的表达，并在肿瘤中诱导DNA损伤、细胞周期阻滞和细胞增殖抑制。此外，与对照组相比，NanoTLZ可有效调节体内免疫细胞数量，并显著(p<0.05)降低肿瘤和脾脏中骨髓源性抑制细胞的比例。　　

　　结论:我们的结果表明，在brca缺陷小鼠中，纳米配方的他拉唑帕尼不仅提高了治疗效果，而且减少了脱靶毒性；预测brca缺陷乳腺癌患者也有同样的可能性。　

　　为了克服口服给药的局限性，提高肿瘤靶向性，我们将他拉唑帕尼包埋在纳米脂质体中。我们的研究表明，这种纳米制剂提高了他拉唑帕尼的疗效，延长了brca缺陷小鼠的无进展生存期和总生存期。与游离他拉唑帕尼相比，NanoTLZ更有效，肿瘤消退和完全消退的百分比更高，导致更大的总生存期和更长的疾病进展时间。此外，我们的纳米配方还降低了他拉唑帕尼的毒性。　　

　　虽然他拉唑帕尼比奥拉帕利更有效，因此用药剂量更低，但临床上它的毒性也更大。55%接受他拉唑帕尼的患者发生了3-4级的不良血液学事件，主要是贫血，25%接受这种PARP抑制剂治疗的患者出现了脱发。其他常见(≥20%)的不良反应包括疲劳、食欲减退、呕吐和恶心。我们的brca缺陷小鼠模型模拟了他拉唑帕尼治疗后在人类患者中观察到的毒性。他拉唑帕尼游离组小鼠体重下降显著(p<0.05)，且均出现脱发现象。令人兴奋的是，nanotzz的毒性降低，明显表现在没有体重减轻和脱发。　　

　　此外，在结合PARP抑制剂和DNA损伤剂44-50的临床试验中也观察到更严重的毒性。在使用PARP抑制剂和一些化疗药物的试验中经历的严重副作用要求减少PARP抑制剂的剂量和暴露，导致亚治疗剂量和无效的组合。在一项口服TLZ联合卡铂的临床试验中，由于不良反应，要求所有患者在第一个周期后延迟治疗和减少剂量。与自由TLZ相比，我们新的纳米脂质体配方nanotzz的耐受性更好，显著改善了PFS和OS。未来的研究将调查当NanoTLZ联合化疗时是否有类似的疗效和毒性结果。　　

　　由于EPR的作用，纳米载体在brca缺陷小鼠的肿瘤中积累，大大提高了靶向肿瘤的特异性。脂质体peg纳米载体也有助于细胞摄取。此外，NanoTLZ诱导了肿瘤中MDSCs的显著减少，这在游离他拉唑帕尼治疗中没有发现。nanootlz也增加了T细胞进入brca缺陷小鼠乳腺病变前部位的浸润。虽然在接受奈诺茨和静脉注射的TLZ治疗24小时后，在肿瘤裂解液中没有检测到药物水平的显著差异，但我们在比较奈诺茨和游离他拉唑帕尼时所描述的多种不同效应是这种新型给药系统的重要优点。虽然EPR的作用依赖于模型，但如果在人类中观察到类似的EPR作用，使用纳米颗粒制剂对他拉唑帕尼的改善可以带来更好的治疗效果和改善乳腺癌患者治疗期间的生活质量。　　

　　随着纳米技术的发展及其独特的特性，纳米医学已成为一种很有前途的癌症治疗方法。Doxil(阿霉素脂质体制剂)和Abraxane(紫杉醇白蛋白结合纳米颗粒)是两种成功的给药纳米颗粒。Doxil是美国fda批准的第一个纳米药物，循环时间长，疗效好于其他形式的盐酸阿霉素，副作用少。Abraxane，即nabi -紫杉醇，由于紫杉醇的亲脂性，被设计用来克服传统配方的有效药物传递障碍。　　

　　迄今为止，Abraxane已被批准用于转移性乳腺癌、非小细胞肺癌和胰腺癌的治疗。选择脂质体作为纳米载体，我们的研究具有临床意义。脂质体因其生物相容性和生物降解性而成为第一个被批准的药物传递载体。超过10种脂质体配方已被批准用于不同的适应症，许多其他脂质体正在进行临床试验。脂质体药物具有一系列优点，包括更大的溶解度，增加半衰期，能够克服耐药性，并增加对靶点的特异性。虽然脂质体的一个缺点是被RES快速捕获和清除，但它可以通过脂质体的聚乙二醇化，诱导空间位阻来克服。　　

　　其他几个小组已经研制出纳米PARP抑制剂。一种基于脂质的可注射的奥拉帕尼纳米制剂被开发出来，使PTEN/ tp53缺陷前列腺癌对放射敏感。肿瘤特异性蛋白也可以偶联到脂质体上以增强靶向药物传递。例如，在动物模型中，凝集素靶向脂质体增强PARP抑制剂治疗卵巢癌的疗效。最近，一种固体脂质纳米颗粒配方的他拉唑帕尼被报道，并已在体外BRCA1突变三阴性乳腺癌细胞系中进行了测试。在这里，我们开发了一种新的基于脂质体的他拉唑帕尼纳米制剂，据我们所知，这是第一个广泛评估其在自发性和临床相关的乳腺癌小鼠模型中的作用。　　

　　值得注意的是，我们还研究了他拉唑帕尼的免疫调节作用，并在本研究中将其与nanotzz进行了比较。在卵巢癌小鼠模型中，他拉唑帕尼增加了腹膜CD8+ T细胞和NK细胞55。我们首次在一个brca缺陷乳腺癌模型中描述了肿瘤微环境中的免疫群体。Brca1Co/Co；MMTV-Cre；通过这种自发性肿瘤模型，形成了完整的免疫系统，使我们能够研究内源性肿瘤微环境。值得注意的是，我们的数据显示他拉唑帕尼降低了MDSCs的比例，MDSCs是一个免疫抑制群体。在减少肿瘤中的MDSCs方面，NanoTLZ比游离他拉唑帕尼更有效。　　

　　已知MDSCs可以抑制乳腺癌患者的宿主免疫反应，限制免疫治疗的有效性。同时，另一种免疫抑制群体T调节细胞的标记物Foxp3的表达在nanotzz治疗后降低。除了他拉唑帕尼外，NanoTLZ还有其他作用，可以调节病变前部位的免疫细胞，这表明NanoTLZ对新发肿瘤有潜在的作用。RNAseq分析提示，NanoTLZ调控的是免疫相关基因，而不是他拉唑帕尼(talazoparib)，这可能解释了NanoTLZ和他拉唑帕尼在免疫调节方面的差异。有趣的是，一些免疫调节作用可能是由纳米载体引起的，如空的纳米颗粒上调Cxcl12的表达。此外，我们的初步数据表明，与自由TLZ相比，纳米TLZ处理树突状细胞的激活程度更高，这将在未来的研究中得到充分的探索。详情请扫码咨询：