吉非替尼(Gefitinib)是否可以增强顺铂的作用

　　表皮生长因子受体 (EGFR) 在包括口腔鳞状细胞癌 (OSCC) 在内的多种实体瘤中高度表达，并且与这些肿瘤对顺铂的耐药性有关。进行这项研究是为了确定 EGFR 酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼（Gefitinib）是否可以增强顺铂对体外 OSCC 细胞的作用。

　　方法：

　　Western印迹检测EGFR的表达及其下游信号转导ERK和AKT通路的磷酸化。细胞增殖和存活分别通过 AlamarBlue 和集落形成试验测定。细胞凋亡通过对裂解的 PARP 蛋白的蛋白质印迹和用膜联蛋白 V 和 PI 染色的细胞的流式细胞术测定。

　　结果：

　　用 1 μM 吉非替尼处理的 Cal27、OSC19 和 SCC25 细胞表明 EGFR、AKT 和 ERK 蛋白的磷酸化降低，对增殖的抑制非常有限。顺铂以剂量依赖性方式抑制相同细胞系的增殖。在吉非替尼 1 μM 的存在下，顺铂产生 50% 抑制 (IC50)的浓度降低，并且顺铂 5 μM 和吉非替尼 1 μM 的组合引起协同生长抑制和细胞存活的协同降低。该组合的生长抑制作用与减少的 ERK 和 AKT 活化、增加聚 ADP 核糖聚合酶 (PARP) 切割和增加细胞凋亡有关。

　　结论：

　　因此，在体外 OSCC 细胞中，吉非替尼对 EGFR 活性的抑制增强了顺铂的凋亡作用。这对于在过度表达 EGFR 的肿瘤中增强顺铂有效性具有潜在意义。

　　口腔鳞状细胞癌 (OSCC) 细胞系 Cal27、OSC19 和 SCC25 以高水平表达表皮生长因子受体 (EGFR)，并具有低基础磷酸化 EGFR (pEGFR)。OSCC 细胞系具有功能性 EGFR-ERK 和 EGFR-AKT 信号通路。在 1 μM 时，吉非替尼可降低未刺激和 EGF 刺激细胞中的 AKT 和 ERK 活化。顺铂以剂量依赖性方式抑制 OSCC 细胞的生长、增殖和存活。顺铂与吉非替尼联合使用可增强顺铂的细胞毒性。这与增加的聚 ADP 核糖聚合酶 (PARP) 切割和增加的凋亡细胞群有关。

　　表皮生长因子受体 (EGFR) 与癌细胞的存活和增殖有关。EGFR 在人口腔鳞状细胞癌 (OSCC) 中高度表达。高EGFR表达与抗性相关联，以在OSCCs如顺铂的治疗中使用的化学治疗剂5-氟尿嘧啶（5FU），环磷酰胺和多柔比星。

　　经由通过胞外信号调节激酶（ERK）和AKT下游的信号中，EGFR在癌症细胞生理学的多个方面，包括存活，增殖，侵袭，转移，血管生成和细胞凋亡。EGFR已经被确认为在头部和颈部鳞状细胞癌的治疗靶标，以及各种EGFR抑制剂在几种人类癌症治疗中使用。

　　吉非替尼（Gefitinib）是一种低分子量酪氨酸激酶抑制剂，通过竞争ATP结合EGFR的催化激酶结构域，从而抑制EGFR及其下游信号通路的磷酸化。临床前体外研究表明，吉非替尼抑制 EGFR 导致细胞增殖、存活和迁移降低，并对药物敏感（产生 50% 抑制的浓度 [IC50] 范围从 <1 到 13 μM），具体取决于癌细胞类型和EGFR 蛋白中是否存在致敏突变。早期临床试验表明，吉非替尼在多种实体瘤类型（包括肺癌、头颈癌、结肠癌、乳腺癌和前列腺癌）患者中通常具有良好的耐受性。自从 2003 年将酪氨酸激酶抑制剂 (TKI) 引入实体瘤的临床应用以来，已经确定了几种分子生物标志物，包括基因突变、EGFR 蛋白表达和 EGFR 基因拷贝数，并表明它们在预测对治疗的反应方面具有潜在价值。

　　在本研究中，我们评估了 EGFR-TKI 吉非替尼与顺铂联合对 OSCC 细胞系 Cal27、OSC19 和 SCC25 体外增殖、存活、细胞信号传导和凋亡的影响。已知这些细胞系表达野生型 EGFR 并具有完整的下游 ERK 和 AKT 信号通路，这使它们成为研究 EGF-TKI 在 OSCC 中作用的合适模型。

　　与单独使用顺铂相比，吉非替尼和顺铂的组合导致所有三种 OSCC 细胞系的细胞数量和集落形成显着减少。这与 ERK 和 AKT 信号减少、PARP 裂解增加和细胞凋亡增加相吻合。这些效果似乎是协同的。单独用顺铂处理导致 Cal27 细胞中的 ERK 激活，这可能有助于抵抗其生长抑制作用。加入 1 μM 吉非替尼可消除这种顺铂诱导的 ERK 激活，该浓度本身不会引起生长抑制。因此，响应顺铂治疗的 ERK 信号增加可能是 EGFR 依赖性的。

　　确定吉非替尼联合治疗提高了顺铂治疗效果的肿瘤不仅对于提高癌症存活率很重要，而且如果可以用较低剂量的顺铂实现相同的肿瘤反应，那么对于降低毒性也很重要。这对于经常营养不良且无法耐受最大剂量细胞毒性药物的 OSCC 患者可能具有重要意义。

　　结论：

　　EGFR-TKI吉非替尼使 OSCC Cal27、OSC19 和 SCC25 细胞对顺铂的生长抑制和促凋亡作用敏感。这些体外观察表明需要更彻底地了解 HNSCC 中的分子串扰。如果在体内观察到类似的效果，在适当的情况下，与吉非替尼联合治疗可能会增强顺铂效果或减少所需的顺铂剂量，从而降低毒性。因此，确定可以观察到这种效应的人类肿瘤并找到这种效应的预测因子将是至关重要的。微信扫描下方二维码了解更多：